ارزیابی پاسخهای ایمنی محافظتی مخلوط lps وپروتئین نوترکیب caga هلیکوباکترپیلوری در موشbalb/c

گروههای موشی با آنتی ژنهای rcaga+ cpg، lps + cpg،pbs و r caga+ lps + cpg سه بار از طریق خوراکی و دو بار از طریق داخل عضلانی طی فواصل 10 روزه ایمن شدند. پاسخ های اختصاصی اینترفرون گاما، اینترلوکین 4، اینترلوکین 10و tgf? در طحال موش های ایمن شده بعد از مواجهه با سویه ss1 با روش الایزا اندازه گیری شد.میزان کشندگی لیپو پلی ساکارید هلیکوباکتر پیلوری نسب به e. coli و بروسلا کمتر بود. میزان توکسیسیته و کشندگی سروتیپ o2 نسبت به بقیه پایین تر بود. تیترهای آنتی بادی igg1 و igg2a اندازگیری و نسبت igg2a/igg1 در گروه rcaga + cpg بیشتر از یک بوده که نشانه ایمنی سلولی است. اطلاعات نشان می دهد که ایمونیزاسیون با rcaga+ lps + cpg پاسخ ایمنی th1 را افزایش داده که برای پاکسازی هلیکو باکتر پیلوری ضروری است. پروتئین نوترکیب caga در غلظت یک میکرگرم قادر به تحریک بسیار مناسب تکثیر لنفوسیتها (mtt ) بود.الیگو نوکلئوتید cpg ادجوانت مناسبی جهت تحریک پاسخ ایمنی th1 گزارش شده است.پاسخ قوی ایمنی th1 در اثر ایمونیزاسیون با rcaga + lps + cpg مشاهده گردید. به منظور تایید پاسخ th1/th2 تولید سایتوکاین های اختصاصی آنتی ژن بعد از مواجهه با سویه ss1 اندازه گیری گردید.اگرچه در هر دو گروه rcaga +lps + cpg و lps + cpg افزایش تولید اینترلوکین 12 و اینتر فرون گاما سلولهای طحالی مشاهده گردید اما در گروه rcaga+ lps+ cpg افزایش مشخصی نسبت به تمامی گروهها مشاهده گردبد(p<0.05 ( .بین گروه کنترل و rcaga+cpg هیچ اختلاف مشخصی مشاهده نگردید.برعکس در گروه rcaga + cpg افزایش مشخصی در تولید اینترلوکین4 (p<0.04 ) و افزایش تیتر igg1 مشاهده گردید. در گروه ایمن شده با rcaga+lps+cpg افزایش فوق العاده ای در پاسخ ایمنی سلولی مشاهده شده که نشانه اثر سینرژیستی این دو کاندید ایمونیزاسیون می باشد.در گروه ایمونیزه شده با rcaga + lps + cpg و lps + cpg میزان اینتر لوکین 10 و tgf? نیز بعد از مواجهه افزایش نشان داد که نشان دهنده این است که حضور lps موجب تحریک تولید سایتوکاین های تنظیمی و بالانس th1/th2 شده و از بروز التهاب ممانعت می کنند.به خاطر بروز پاسخ قوی ایمنی سلولی th1 موشها از عفونت با این باکتری حفاظت شده و 6log میزان باکتری بعد از مواجهه کاهش یافت. با کاهش لود باکتری در بررسی پاتولوژی معده، التهابی مشاهده نگردید که نشان دهنده این است ترکیب rcaga+lps+ cpg قادر است با تولید سایتوکاین های تنظیمی از بروز التهاب ممانعت نماید. پروتئین 32 کیلودالتونی rcaga طراحی شده در این تحقیق، حفاظت شده و ایمونوژنی مناسب بوده که برای ترکیب کاندید واکسن هلیکوباکتر پیلوری پیشنهاد می گردد. در این تحقیق نشان داده شد که841 باز انتهای آمینه caga حفاظت شده و ایمونوژن بوده و قادر است پاسخ مناسب ایمنی سلولی th1 را در مدل موشی القاء نماید. نتایج نشان داد که rcaga آنتی ژنسیته وایمونوژنسیته بهتری از پروتئین طبیعی caga و نوترکیب کامل القاء می کند.